植物組培技術(shù)的發(fā)展過(guò)程：

植物組培技術(shù)開(kāi)始于19世紀(jì)后半葉，當(dāng)時(shí)植物細(xì)胞全能性的概念還沒(méi)有完全確定，但基于對(duì)自然狀態(tài)下某些植物可以通過(guò)無(wú)性繁殖產(chǎn)生后代的觀(guān)察，人們便產(chǎn)生了這樣一種想法即能否將植物體的一部分在適當(dāng)?shù)臈l件下培養(yǎng)成一個(gè)完整的植物體，為此許多植物科學(xué)工作者開(kāi)始了培養(yǎng)植物組織的嘗試。最初的問(wèn)題仍然是集中在植物細(xì)胞有沒(méi)有全能性和如何使這種全能性表現(xiàn)出來(lái)。

1839年Schwann提出細(xì)胞有機(jī)體的每一個(gè)生活細(xì)胞在適宜的外部環(huán)境條件下都有獨(dú)立發(fā)育的潛能。1853年trecul利用離體的莖段和根段進(jìn)行培養(yǎng)獲得了愈傷組織，愈傷組織是指一種沒(méi)有器官分化但能進(jìn)行活躍分裂的細(xì)胞團(tuán)，但這還不能證明細(xì)胞具有全能性，因?yàn)橛捎鷤�組織沒(méi)能再生出完整植物體。1901年Morgan首次提出一個(gè)全能性細(xì)胞應(yīng)具有發(fā)育出一個(gè)完整植株的能力。所謂全能性細(xì)胞就是指具有完整的膜系統(tǒng)和細(xì)胞核的生活細(xì)胞，在適宜的條件下可通過(guò)細(xì)胞分裂與分化，再生出一個(gè)完整植株。White指出：如果一個(gè)給定的有機(jī)體的所有細(xì)胞都大致相同，并具有全能性，那么在有機(jī)體內(nèi)所觀(guān)察到的細(xì)胞分化必定是這些細(xì)胞對(duì)有機(jī)體內(nèi)微環(huán)境和周?chē)�環(huán)境的反應(yīng)。就是說(shuō)機(jī)體內(nèi)每個(gè)細(xì)胞所以沒(méi)有表現(xiàn)出全能性，是因?yàn)樵摷?xì)胞所處位置的不同，致使其某些功能被抑制（suppressed),這充分說(shuō)明機(jī)體內(nèi)的微環(huán)境因素在細(xì)胞分化中起了十分重要的作用。按照現(xiàn)代發(fā)育生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的理論，細(xì)胞分化是受基因在時(shí)間和空間兩個(gè)方面的調(diào)控，空間就是指細(xì)胞在機(jī)體內(nèi)所處的位置。不同位置的細(xì)胞，其基因的表達(dá)不同，細(xì)胞所表現(xiàn)出的形態(tài)結(jié)構(gòu)和行為就不同。如果將一個(gè)生活的細(xì)胞從植物體內(nèi)分離出來(lái)，使之脫離開(kāi)原有的環(huán)境，細(xì)胞被抑制的功能將有望得以恢復(fù)，重新表現(xiàn)出全能性�；�于這種認(rèn)識(shí)，科學(xué)工作者便萌生出了植物組織培養(yǎng)技術(shù)的念頭。

Haberlandt(1902)首次提出細(xì)胞培養(yǎng)的概念，也是第一個(gè)用人工培養(yǎng)基對(duì)分離的植物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的人。與rechinger不同，Haberlandt相信切塊大小不會(huì)影響細(xì)胞增殖，但由于Haberlandt使用的培養(yǎng)液成分簡(jiǎn)單，培養(yǎng)的細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，又沒(méi)采取消毒技術(shù)，所以實(shí)驗(yàn)失敗，培養(yǎng)的細(xì)胞雖然存活了幾個(gè)月但沒(méi)能分裂。Haberlandt轉(zhuǎn)而對(duì)損傷修復(fù)發(fā)生興趣，提出激素作用的概念（leptohormone)，與維管組織特別是韌皮部有關(guān)；另一類(lèi)是創(chuàng)傷激素(woundhomone)，與細(xì)胞損傷有關(guān)，為后來(lái)激素理論的建立和在組織培養(yǎng)中的廣泛應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。但自Haberlandt的實(shí)驗(yàn)之后直到1934年White培養(yǎng)番茄離體根尖的成功，其間的30多年里，植物組織培養(yǎng)技術(shù)技術(shù)幾乎沒(méi)有什么進(jìn)展。分析其原因，主要就是培養(yǎng)基的成分和實(shí)驗(yàn)所選取的材料不夠合適。

1934年White用離體的番茄根建立了第一個(gè)活躍生長(zhǎng)的無(wú)性系，使根的離體培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)首次獲得了真正的成功，并首次發(fā)現(xiàn)和提出B族維生素B1、維生素B6和煙酸的重要性。與此同時(shí)，Cautheret在山毛柳和黑楊形成層組織的培養(yǎng)中也發(fā)現(xiàn)了B族維生素的作用，并使培養(yǎng)獲得了成功。Nobecourt也用胡蘿卜建立了類(lèi)似的連續(xù)生長(zhǎng)的組織培養(yǎng)物。因此，Haberlandt、White和Nobecourt一起被譽(yù)為植物組織培養(yǎng)技術(shù)的奠基人。人們現(xiàn)在所用的若干培養(yǎng)方法和培養(yǎng)基，原則上都是他們?cè)?939年所建立的方法和培養(yǎng)基演變的結(jié)果，幾乎所有的培養(yǎng)基中都添加了不同種類(lèi)和不同數(shù)量的B族維生素。從此植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)入快速發(fā)展時(shí)期。1941年，Overbeek、Conklin和Blakeslee等用附加椰乳到培養(yǎng)基中，獲得了Datura離體胚培養(yǎng)的成功。椰乳成分復(fù)雜，含有多種不同的有機(jī)物，后來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，其中在組織培養(yǎng)中起主要作用的是腺嘌呤類(lèi)激素或類(lèi)似物。1944年，Skoog報(bào)道DNA的降解產(chǎn)物腺嘌呤和腺苷可以促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)，解除生長(zhǎng)素對(duì)芽形成的抑制作用，誘導(dǎo)芽的形成。1948年，Caplin和Steward用實(shí)驗(yàn)證明椰乳與2,4-D配合，對(duì)培養(yǎng)的胡蘿卜和馬鈴薯組織的增殖起到明顯的促進(jìn)作用。在用煙草髓細(xì)胞誘導(dǎo)愈傷組織的實(shí)驗(yàn)中，Skoog,Miller等分離確定了6-呋喃氨基嘌呤對(duì)細(xì)胞分裂有促進(jìn)作用，并命名為“激動(dòng)素”（Kinetin)。之后，與此相關(guān)的同系物6-芐氨基嘌呤被合成，它也刺激培養(yǎng)物的細(xì)胞分裂。于是，出現(xiàn)了“細(xì)胞分裂素”這一集合名詞，專(zhuān)門(mén)用來(lái)指能刺激培養(yǎng)物細(xì)胞分裂的一組6-某基團(tuán)的氨基嘌呤化合物。爾后，玉米素、異戊烯基腺嘌呤和其他細(xì)胞分裂素等植物激素的相繼發(fā)現(xiàn)，更增加了細(xì)胞分裂素的種類(lèi)。由于發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素相互配合能調(diào)節(jié)細(xì)胞的分裂與分化，控制器官的分化，生長(zhǎng)素高時(shí)可誘導(dǎo)根的形成，細(xì)胞分裂素高時(shí)可促進(jìn)芽的分化，使植物組織培養(yǎng)技術(shù)的工作迅速取得突破。1958年美國(guó)的Steward和德國(guó)的Reinert分別由培養(yǎng)的胡蘿卜細(xì)胞誘導(dǎo)形成了胚狀體，1965年由Vasil和Hildebrandt用單個(gè)分離的細(xì)胞培養(yǎng)獲得整個(gè)植株的再生，從而使植物細(xì)胞全能性的理論真正得到了科學(xué)的證實(shí)。從此之后，一批又一批植物的組織或器官通過(guò)培養(yǎng)的方法獲得了再生植株。

20世紀(jì)60年代，在植物組織培養(yǎng)技術(shù)方面的另外兩項(xiàng)成就就是劃分小孢子培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)的成功。Guha和Maheshwari（1966，1967），Rourgin和Nitsch（1967）先后利用煙草和胡蘿卜的小孢子培養(yǎng)獲得單倍體植株，并成功地實(shí)現(xiàn)了染色體的加倍，使這種同源二倍體植株在5個(gè)月內(nèi)收獲到種子。Cocking等用純化的纖維素酶和果膠酶處理煙草細(xì)胞，獲得原生質(zhì)體，通過(guò)調(diào)節(jié)滲透壓的方法控制原生質(zhì)體膨脹，使培養(yǎng)獲得成功，得到了再生植株。自20世紀(jì)60年代始，植物組織與細(xì)胞培養(yǎng)逐漸走向了工廠(chǎng)化和商品化階段。

現(xiàn)在已不能確切統(tǒng)計(jì)有多少種植物通過(guò)組織培養(yǎng)的方法獲得了再生植株，因?yàn)閹缀趺刻於加锌赡艹霈F(xiàn)利用新的植物種類(lèi)獲得培養(yǎng)成功的報(bào)道。植物組織培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)變成了一種常規(guī)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，廣泛應(yīng)用于植物的脫毒、快繁、基因工程、細(xì)胞工程、遺傳研究、次生代謝物質(zhì)的生產(chǎn)、工廠(chǎng)化育苗等多個(gè)方面；從高級(jí)的研究機(jī)構(gòu)、大專(zhuān)院校到普通的生物技術(shù)公司，甚至農(nóng)民專(zhuān)業(yè)戶(hù)都在不同程度的利用或開(kāi)展組織培養(yǎng)工作。

植物組織培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)走過(guò)了近百年的歷程。它的歷史不僅證明了植物的每一個(gè)生活細(xì)胞都含有一種植物的全部遺傳信息，在一定的條件下可以發(fā)育成一個(gè)完整的植株，而且在一定范圍內(nèi)人們可以按照意愿，改變和調(diào)節(jié)植物的發(fā)育。但這種調(diào)節(jié)和改變知識(shí)局部的，主要是通過(guò)改變培養(yǎng)基中的激素和培養(yǎng)條件，從遺傳基礎(chǔ)上的徹底改造僅僅是開(kāi)始。但是，生命的奧秘是很深遠(yuǎn)的，植物也如此，科學(xué)家至今仍不能實(shí)現(xiàn)對(duì)所有植物的組織培養(yǎng)再生，對(duì)基因型對(duì)組培技術(shù)成功的影響至今仍迷惑不解，而且對(duì)已經(jīng)獲得成功的植物，也還是有很多問(wèn)題沒(méi)有解決。即便像煙草和擬南芥這樣的模式植物，也沒(méi)能實(shí)現(xiàn)讓它們?cè)诮M培技術(shù)容器中遂愿的生長(zhǎng)發(fā)育和開(kāi)花結(jié)實(shí)。人們對(duì)植物的認(rèn)識(shí)、了解和掌握，仍然處于必然王國(guó)階段，單就其組織培養(yǎng)而言，還有十分漫長(zhǎng)的道路要走。